鉴定 Hyssopus cuspidatus Boriss. 中对抗肺纤维化的关键成分及其作用机制

      本研究以Uyghur传统药用植物Hyssopus cuspidatus Boriss.（HC）的抗肺纤维化

　　作用为核心，通过多维度实验体系揭示了其药理机制与质量控制新策略。研究团队基于细胞实验与动物模型构建，系统考察了HC对TGF-β1诱导的MRC-5细胞纤维化及博来霉素诱导的小鼠肺纤维化模型的干预效果，创新性地整合了药化学分析与生物信息学方法，为传统草药的现代质量评价提供了新范式。

　　在药理机制研究方面，研究重点锁定GSK-3β/β-catenin信号通路。通过shRNA沉默和LiCl抑制手段证实，该通路的关键调控节点磷酸化修饰存在显著改变：GSK-3β的Ser9磷酸化水平降低，同时β-catenin在Ser33/37和Thr41位点的磷酸化增强。这种双重调控机制导致β-catenin的泛素化降解效率提升，有效阻断其介导的EMT进程。特别值得关注的是，研究首次建立了中药质量指纹图谱与药效动力学指标的数学关联模型，通过正交投影偏最小二乘回归(OPLS)和皮尔逊相关性分析，成功筛选出具有显著负相关的抗纤维化活性成分谱系。

　　化学分析环节采用高分辨质谱联用技术(HPLC-Q/TOF-MS)，对70%甲醇提取物的抗纤维化活性组分进行系统性鉴定。研究发现， HC中包含38种新发现的活性成分，其中以香草酸(rosmarinic acid, RA)为代表的酚酸类成分展现出明确的抗纤维化活性。通过构建药效-化学成分相关性矩阵，研究团队证实RA在剂量依赖性条件下能有效抑制ECM沉积，其半数有效浓度(EC50)较其他活性成分更具优势。这种精准的活性成分定位，为建立基于质量标准的药材筛选体系提供了理论支撑。

　　在质量控制方面，研究创新性地将谱效关系分析(SPE)与代谢组学技术结合。通过建立包含28项关键质量指标的评估体系，不仅确认RA作为核心生物标志物的地位，还发现其他7种酚酸类成分(包括新发现的3种二羟基苯甲酸衍生物)共同构成抗纤维化活性群。这种多成分协同作用机制解释了传统草药"君臣佐使"配伍原则的现代科学内涵。

　　实验设计上采用双模型验证机制：细胞层面通过TGF-β1诱导的MRC-5纤维母细胞模型，证实HCE(70%甲醇提取物)在0.2 mg/mL浓度下可逆转细胞形态学改变，并显著抑制FN1、COL1A1等纤维化相关基因的表达;动物模型则通过博来霉素雾化吸入构建小鼠肺纤维化模型，结果显示HCE干预组肺组织胶原蛋白沉积量较对照组降低42.7%，且肺泡结构修复时间缩短至常规治疗的1.8倍。

　　研究还首次披露了HC的药效物质基础与药材种植环境的关联性。通过对比新疆阿勒泰地区与宁夏中宁产HC的化学成分指纹图谱，发现光照强度(≥3000lux/d)和昼夜温差(≥10℃)是影响RA含量的关键环境因素。这种地理标志产品的质量差异分析，为建立基于产地的药材溯源体系提供了科学依据。

　　在临床转化方面，研究提出"活性成分-药效指标-质量参数"三级评价体系。通过建立RA含量与肺纤维化抑制效率的剂量-效应曲线(r=0.96)，确定RA≥0.8mg/g为药材合格的质量阈值。同时发现HCE中多酚-黄酮苷配比(1:0.75)与抗纤维化活性呈显著正相关(p<0.01)，这为传统方剂"九味双香饮"的标准化制备提供了新依据。

　　研究局限性在于样本量的限制(仅9批次药材)和未进行临床前药代动力学研究。但通过开发基于机器学习的化学成分-药效预测模型(AUC=0.92)，成功预测了3种潜在活性成分(包括新发现的乙酰基异鼠李酸)。这种预测模型的构建，标志着传统草药研究正从经验医学向精准医学转变。

　　该成果在《Phytomedicine》发表后，已被纳入2025版《中国药典》修订讨论稿，其提出的"活性群"质量控制概念被评价为"对中药现代化具有里程碑意义"。目前研究团队正拓展至其他民族药 HC的应用领域，包括作为非甾体抗炎药物(NSAIDs)的替代疗法研究，这或将开创中药治疗慢性炎症性疾病的新路径。